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體外藥物評估在新藥開發領域具有加速藥物篩選、提高藥物安全性的作用，對個體化醫療具有重要意義。但傳統藥物評估過程中，藥物遞送方法依賴于細胞和藥物的共同培養，藥物分子通過被動擴散的方式被細胞內化（>數小時）和細胞活力測量（>1天）的限制，這構成了臨床藥物篩選和開發的障礙。因此，快速、準確地藥物評估的新技術仍具有廣泛的需求。
該研究報告了一種納米電穿孔-DNA張力傳感生物芯片，由納米電穿孔遞送模塊和DNA張力傳感檢測模塊組成。兩模塊之間通過拼圖式的結構組裝，增強了器件的靈活性，允許模塊的獨立設計和替換，提供個性化定制的可能，以及支持系統的擴展和升級
為驗證納米電穿孔介導的藥物輸送的速度、效率和安全性，首先建立了一個細胞物理模型，分析了納米通道上細胞周圍的電場和電勢分布（圖2a-c）。結果顯示，當施加的系統電壓在10V-40V范圍內時，會產生＞1V的跨膜電勢（細胞膜內外的電勢差），成功地在細胞膜上進行了電穿孔。與此同時，納米通道具有聚焦電場的功能（圖2b），確保在低電壓下有足夠的電泳力將藥物分子推入細胞內。隨后驗證了納米電穿孔遞送模塊較高的安全性（98%）和高效的遞送效率（90%）（圖2d-f），同時將細胞內遞送速度提高了103倍，藥物內化時間縮短至～3秒。
在納米電穿孔遞送模塊完成藥物遞送后，細胞被消化后沿著微流道進入DNA張力傳感器模塊。該DNA張力傳感器通過修飾的自發地嵌入細胞膜。在藥物的刺激作用下，一旦細胞力學變化超過DNA張力傳感器預設的力的閥值，DNA張力傳感器發生結構性變化，導致熒光信號的產生。通過分析細胞力學特性的變化情況進而分析細胞的活性。在此，我們使用DNA張力傳感器模塊評估了在不同濃度（0、20、40、60和80 μg/mL）下藥效。其結果和CCK-8試驗對于細胞存活率的定量結果一致，確認了這一DNA張力傳感器用于細胞存活評估的可靠性
最后，以抗腫瘤藥物DOX作為藥物模型，并采用A549細胞（人類非小細胞肺癌）作為細胞模型進一步驗證了NDT平臺的功能性。結果顯示，NDT介導的藥物遞送，在1分鐘內可觀察到DOX（紅色熒光信號）被成功遞送進細胞內（圖3a-b）。而且，在同一藥物濃度的情況下，基于納米電穿孔技術的NDT平臺能有效地提高了細胞的藥物內化率。同時，DNA張力傳感器模塊能夠以熒光信號的強弱直接、快速（＜30分鐘）地反映藥物刺激下細胞活性的變化情況（圖3c-e）。而傳統試驗需要> 24小時才能進行一輪藥物評估。研究結果證明了該平臺具有高速、高效和安全性，是一種簡單而強大的臨床藥物篩選工具。
來源：傳感器專家網
